欧美日韩国产不卡在线看,免费观看国产黄色av大片,欧美日韩中文字幕精品视频,97精品国语高清自产拍

　　胍類(lèi)消毒劑作為一類(lèi)廣譜、低毒的陽(yáng)離子表面活性劑類(lèi)消毒劑，憑借其對(duì)細(xì)菌、真菌及部分病毒的殺滅能力，以及對(duì)人體刺激性小、腐蝕性低的優(yōu)勢(shì)，廣泛應(yīng)用于醫(yī)療環(huán)境、食品加工車(chē)間、公共衛(wèi)生場(chǎng)所及家庭日常消毒等場(chǎng)景。然而，胍類(lèi)消毒劑的病毒滅活效果受其種類(lèi)、濃度、作用時(shí)間、環(huán)境條件等因素影響較大，若效果不達(dá)標(biāo)，可能導(dǎo)致病毒傳播風(fēng)險(xiǎn)。因此，科學(xué)開(kāi)展胍類(lèi)消毒劑病毒滅活效果驗(yàn)證，既是保障消毒質(zhì)量的關(guān)鍵，也是防范病毒擴(kuò)散的重要環(huán)節(jié)。

　　胍類(lèi)消毒劑病毒滅活效果驗(yàn)證方法步驟

　?。?）制備病毒懸液

　　將試驗(yàn)病毒株接種至敏感細(xì)胞，在37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至細(xì)胞出現(xiàn)明顯病變（CPE），收集病毒培養(yǎng)液，經(jīng)離心去除細(xì)胞碎片后，測(cè)定病毒滴度，用無(wú)菌PBS將病毒懸液稀釋至所需濃度，確保染毒量滿(mǎn)足試驗(yàn)要求。

　?。?）模擬染毒與有機(jī)物干擾

　　取無(wú)菌載體，每片滴加0.05mL病毒懸液，置于生物安全柜中自然干燥，模擬物體表面被病毒污染的場(chǎng)景；若需模擬有機(jī)物干擾，則在滴加病毒懸液前，先滴加0.05mL有機(jī)物干擾物，干燥后再滴加病毒懸液。

　　（3）消毒處理

　　將染毒后的載體放入無(wú)菌離心管中，按驗(yàn)證方案加入一定體積的胍類(lèi)消毒劑稀釋液，確保消毒劑完全覆蓋載體，置于設(shè)定溫度下，作用規(guī)定時(shí)間。同時(shí)設(shè)置對(duì)照組：

　　空白對(duì)照組：僅加病毒懸液，不加消毒劑；

　　中和劑對(duì)照組：加病毒懸液+中和劑，驗(yàn)證中和劑對(duì)病毒無(wú)毒性；

　　載體對(duì)照組：僅加載體+消毒劑+中和劑，驗(yàn)證載體、消毒劑對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性。

　?。?）病毒回收與中和

　　到達(dá)設(shè)定作用時(shí)間后，立即向離心管中加入過(guò)量中和劑，振蕩混勻后靜置10分鐘，徹底終止消毒反應(yīng)；隨后用無(wú)菌PBS稀釋回收液，用于后續(xù)病毒滴度測(cè)定。

　　（5）病毒滴度測(cè)定：

　　采用TCID??法測(cè)定回收液中的病毒滴度：將不同稀釋度的回收液分別接種至96孔細(xì)胞培養(yǎng)板（每孔100μL），每個(gè)稀釋度設(shè)置4-8個(gè)復(fù)孔，同時(shí)加入敏感細(xì)胞懸液（每孔100μL），置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天，每天觀(guān)察細(xì)胞病變情況，記錄出現(xiàn)病變的孔數(shù)，采用Reed-Muench法計(jì)算病毒滴度（TCID??/mL）。

　?。?）結(jié)果判定：

　　根據(jù)病毒滴度計(jì)算胍類(lèi)消毒劑對(duì)病毒的殺滅對(duì)數(shù)值（KL），公式為：

　　KL=lg（對(duì)照組病毒滴度）-lg（消毒組病毒滴度）

　　結(jié)合驗(yàn)證依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)要求判定結(jié)果：

　　對(duì)于用于普通物體表面消毒的胍類(lèi)消毒劑，若對(duì)包膜病毒的殺滅對(duì)數(shù)值≥4.0，對(duì)無(wú)包膜病毒的殺滅對(duì)數(shù)值≥3.0，判定為病毒滅活效果合格；

　　對(duì)于用于醫(yī)療關(guān)鍵器械消毒的胍類(lèi)消毒劑（如口腔器械），需達(dá)到更高要求，對(duì)包膜病毒和無(wú)包膜病毒的殺滅對(duì)數(shù)值均需≥5.0；

　　若對(duì)照組病毒滴度低于10?TCID??/mL（說(shuō)明病毒活性不足），或中和劑對(duì)照組病毒滴度下降≥1.0lg（說(shuō)明中和劑對(duì)病毒有毒性），則試驗(yàn)無(wú)效，需重新開(kāi)展。